技術原理

流式細胞技術（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）        流式細胞術（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒（如微球、細菌、小型模式生物等）逐個進行快速定量分析和分選的技術，即在流動的狀態(tài)中檢測細胞或顆粒的各項特性，具有特異性強，靈敏度高，速度快，并能實現(xiàn)多參數(shù)分析的特點。                常規(guī)分析型流式細胞儀原理圖 CytoFLEX系列 流式細胞儀，擯棄傳統(tǒng)光電倍增管（PMT），采用固體、高效、低噪音光纖二極管陣列檢測器（FAPD）設計而成的波分復用（WDM）檢測模塊，大幅提升儀器的靈敏度，使對稀有細胞和微顆粒的檢測水平有了質(zhì)的飛躍。 產(chǎn)品應用/特點   ·創(chuàng)新性設計，助推細胞研究 CytoFLEX平臺 桌面型流式細胞儀系列，采用創(chuàng)新性的設計，將光學部件與流動室進行整合，最大限度降低光損失，帶來無與倫比的激發(fā)與發(fā)射性能，實現(xiàn)更高信號分辨率下更為準確的數(shù)據(jù)采集。 CytoFLEX系列將持之以恒地充分發(fā)揮下列功能： ·卓越的靈敏度 ·采用臺式分析儀實現(xiàn)微小粒子分析 ·可擴展的插拔式帶通濾光片套件 ·擴展性強，升級靈活 ·軟件直觀，便于多色分析   CytoFLEX系列可輕松完成實驗： ·活力檢測 ·細胞增殖 ·細胞周期分析 ·細胞凋亡 ·DNA分析 ·細菌、酵母和藻類分析 ·細胞絕對計數(shù)   ·專注科研，按實驗需求配置系統(tǒng) CytoFLEX流式細胞儀系列，提供易于使用的系統(tǒng)和完備的性能，使用戶專注于科研本身，省去對于儀器及軟件操作的培訓過程。用戶可以按照實驗室需求配置系統(tǒng)，無論是復雜程度低或高的常規(guī)分析，還是推動流式細胞術發(fā)展的前沿實驗，都可以在該系統(tǒng)上開展。   例：以13色免疫表型分析法分析人外周血中的T細胞亞群 （實驗設計基于細胞表面分子差異表達的分析方法，利用多個標記來捕捉不同的T細胞亞群。實驗過程中，使用紅外激光通道可添加死活細胞分析，解放出其他通道，用于典型的細胞表面標記物分析；同時，紅外激光通道可以降低相對明亮的CD8標記物的補償需求，保持對弱陽性結果檢測的靈敏度。） ·波分復用與集成光路，打造高靈敏度性能 CytoFLEX 平臺系列產(chǎn)品，借助電信行業(yè)技術，采用波分復用（WDM）檢測模塊，依靠光纖和帶通濾光片，將多種波長的光信號分開進行測量，無需使用多個二向色濾光片引導光路，與傳統(tǒng)儀器相比，更容易配置熒光通道，且能夠在最大程度上減少折射而提高光效率。 此外，系統(tǒng)使用集成式光學系統(tǒng)，將光源聚焦到流動池上，實現(xiàn)高效的光路管理，獲得對于熒光標記細胞的最佳激發(fā)和發(fā)射效果，數(shù)據(jù)可呈現(xiàn)出對弱陽性信號的強大鑒別，以及陰性和陽性信號的精準區(qū)分。   例：SPHEROTM 8峰彩虹校準微球檢測結果 （上：藍光通道；中：紅光通道；下：紫光通道。由八峰彩虹微球在CytoFLEX各個通道中的檢測結果可知，CytoFLEX系列不僅在常用的檢測通道中有卓越的靈敏度表現(xiàn)，在紫光和遠紅外通道方面也表現(xiàn)突出。） 例：對低水平表達的調(diào)節(jié)性T細胞的鑒定 （無需進行熒光扣除對照染色，即可對稀有的FoxP3+調(diào)節(jié)性T細胞群進行測定） ·紫光側(cè)向散射功能，檢測可至納米級別 任何粒子所散射的光量與粒子直徑成正比，與用于檢測它的光波長成反比。因此，波長較小的紫光（405nm）和藍光（488nm）在任何粒徑條件下產(chǎn)生的直角光散射多于其他光；此外，光波進入不同折射率的介質(zhì)而被折射時，折射角與光波長成反比，波長越小，折射角越大。 根據(jù)上述物理特性，CytoFLEX平臺配備了觸發(fā)紫光和藍光側(cè)向角散射光的功能，這種靈活性增大了粒子的檢測和分析范圍。在微顆粒（如外泌體、微囊泡和二氧化硅納米粒子）的檢測應用中，CytoFLEX產(chǎn)品可展現(xiàn)出強大實力，其檢測大小極限可低至200nm。   例：納米微顆粒檢測 （使用前向散射和側(cè)向散射光參數(shù)分辨不同大小的微球顆粒） ·檢測線性與智能補償，結果準確且可重復 由于設備中半導體的生產(chǎn)工藝具有極高的一致性，使得CytoFLEX平臺測得的熒光強度與相應的檢測器增益值具有很好的線性度。由多個單次增益設定值獲得的補償矩陣可以相互混合，形成全矩陣，即補償庫。補償庫存儲熒光染料的補償矩陣溢出值，建立智能補償庫，當增益值改變，智能補償庫自動調(diào)節(jié)并確定正確的補償矩陣，對光路進行校正，保持儀器穩(wěn)定性，使用戶輕松獲得準確和可重復性的結果，從容應對多色分析任務。   例：補償庫存儲熒光染料的補償矩陣溢出值 ·數(shù)據(jù)獲取和分析軟件，輕松上手易學易用 CytoFLEX平臺產(chǎn)品配套的CytExpert軟件易學易用，對于任何水平的流式使用者——無論是新手還是經(jīng)驗豐富的流式細胞儀操作者，均能快速掌握和運行操作，根據(jù)實驗便捷自如地設置方案，獲得符合發(fā)表需求的優(yōu)質(zhì)數(shù)據(jù)。   CytExpert特點包括： ·補償實驗配置可在數(shù)據(jù)收集后進行修改 ·補償實驗可使用多種樣本類型（微球/細胞） ·線性增益（電壓），對改變的增益設置自動修改，無需手動調(diào)整補償 ·直觀的GUI手形工具可輕松調(diào)整細胞儀參數(shù)設置 ·自動設置閾值、激光間延遲 ·具有動態(tài)的坐標軸 ·無微球絕對計數(shù) ·加載樣本時可自動混合 ·EMF文件格式，具有批量處理功能 更新后的CytExpert 2.0 版本增加和完善了如下功能： ·每張疊加圖顯示多達10個樣品 ·最高存儲15個通道的2500萬個events數(shù)據(jù) ·散點圖顯示多達50萬個events ·與Win7、Win8或Win10兼容     ·板孔進樣模式，提高工作效率 CytoFLEX平臺產(chǎn)品可配備板孔進樣器，選擇板孔進樣器模式后，進樣器系統(tǒng)可在32分鐘內(nèi)完成一塊96孔板的分析，有效節(jié)省時間，提高工作效率。板孔進樣模式的優(yōu)點還包括： ·在5分鐘內(nèi)即可實現(xiàn)單管和采樣板獲取之間的切換 ·具有便捷的虛擬板布局，配備自定義清洗和混勻功能 ·可在單板上定義多個實驗 ·與平底、U形底和V形底孔板兼容

耗材

濾光片 購置儀器時，即根據(jù)用戶需要配備全套濾光片； 用戶后期可根據(jù)需要自行切換，無需再購買額外的濾光片。

產(chǎn)品規(guī)格

·CytoFLEX流式細胞儀 CytoFLEX可提供傳統(tǒng)的激光調(diào)色板和多個通道，從單激光四色至三激光十三色，滿足大部分基本的流式細胞分析需求。 藍-紅-紫光（B-R-V）系列 CytoFLEX最高配置的儀器包括五個488nm（藍色）熒光通道、三個638nm（紅色）熒光通道和五個405nm（紫色）熒光通道。儀器本身包含13個帶通濾光片，可以根據(jù)需要進行配置。用戶可啟用目前研究所需通道，隨著研究的深入，后續(xù)可增加通道數(shù)量。 帶通濾光片 450/45 585/42 660/10（2） 712/25 525/40（2） 610/20（2） 690/50 780/60（3） 可選配置 激光數(shù) 熒光通道 488NM（藍光） 638NM（紅光） 405NM（紫光） 3 13 5 3 5 3 12 5 3 4 3 12 4 3 5 3 11 4 3 4 3 11 3 3 5 3 10 4 3 3 3 10 5 3 2 2 10 5   5 3 10 5 3 2 3 9 3 3 3 3 9 4 3 2 2 8 5 3   3 8 3 3 2 3 8 4 2 2 3 7 3 2 2 2 6 3 3   2 6 4 2   2 6 3   3 2 6 4   2 3 6 2 2 2 1 5 5     2 5 3 2   1 4 4     2 4 3 1   2 4 2 2   2 4 2   2   CytoFLEX性能參數(shù) 最小上樣體積 10μL 上樣速度 30,000 events/s 校準方式 光路自動校準 軟件 CytExpert采樣與分析軟件 動態(tài)數(shù)據(jù)顯示范圍 7個數(shù)量級 熒光靈敏度 FITC< 30 MESF，PE<10 MESF 信號收集系統(tǒng) Clear Focus，可實現(xiàn)10-7到107的信號顯示 信號處理精度 24 Bit 最小微粒檢測值 200nm 激光器 50mW，全固態(tài)，高功率；非共線激發(fā)；具溫控系統(tǒng)，即開即用 升級空間 最高可至三激光13色 最高單樣本信息存儲量 2500萬個events數(shù)據(jù) 體積 40cm3，適配大部分生物安全柜 ·CytoFLEX S 流式細胞儀 CytoFLEX S型號配置四色激光，擴展了熒光染料調(diào)色板，可以滿足用戶特殊應用的需求。 藍-紅-紫-黃綠光（B-R-V-Y）系列 CytoFLEX S 該款最高配置的儀器包含兩個488nm（藍色）熒光通道、三個638nm（紅色）熒光通道、四個405nm（紫色）熒光通道和四個561nm（黃綠色）熒光通道。 561nm黃色激光激發(fā)RFP及其衍生物（如DsRed、HcRed）的效率優(yōu)于488nm藍色激光。同時，激光空間分隔可提高靈敏度，最大程度地減少激光之間的補償。因此，該款儀器可用于分析表達GFP、YFP、DsRed和HcRed的細胞，以高分辨率獲得同時表達的多色熒光蛋白信號。 儀器本身包含13個帶通濾光片，可以根據(jù)需要進行配置。用戶可啟用目前研究所需通道，隨著研究的深入，后續(xù)可增加通道數(shù)量。 包括13個可復位的帶通濾光片 450/45 585/42 660/10（2） 712/25 525/40（2） 610/20（2） 690/50（2） 780/60（2） 可選配置 激光數(shù) 熒光通道 488NM（藍光） 638NM（紅光） 405NM（紫光） 561NM（黃綠光） 4 13 2 3 4 4 3 10 2   4 4 3 9 2 3   4 4 9 2 2 2 3 3 9 2 3 4   2 6 2     4 3 6 2   2 2 藍-紅-紫-近紫外光（B-R-V-N）系列 CytoFLEX S 375 nm 激光是 CytoFLEX 系列桌面型流式細胞儀的新增選項。該款流式細胞儀可以同時檢測15個參數(shù)，包括13個熒光參數(shù)。最高配置儀器包括488nm（藍）激光：5個通道；638nm（紅）激光：3個通道；405nm（紫）激光：3個通道；375nm（近紫外）激光：2個通道。該款細胞儀最低配備六個熒光通道，用戶可在后期升級至更高參數(shù)配置。 新增的 375 nm 波長激光，在空間分離光束點中，能夠?qū)崿F(xiàn)對 Hoechst、DAPI 和亮紫外（BUV）染料的出色激發(fā)，確保在無需使用真正的紫外光的情況下，即可通過上述染料/熒光染料進行實驗，避免相應的費用，降低研究成本。 包括13個可復位的帶通濾光片 450/45（2） 585/42 660/10 690/50 780/60（2） 525/40（2） 610/20（2） 675/30 712/25   可選配置 激光數(shù) 熒光通道 488NM（藍光） 638NM（紅光） 405NM（紫光） 375NM（近紫外光） 4 13 5 3 3 2 3 10 5 3   2 2 6 4     2 藍-紅-紫-紅外光（B-R-V-I）系列 CytoFLEX?S系列增加808nm激光后，可提供額外的熒光通道，不但可以用于細胞死活鑒定染料，也可以用于其光譜與傳統(tǒng)通道重疊程度最小的高亮度熒光標記。 該款最高配置的儀器包含四個488nm（藍色）熒光通道、三個638nm（紅色）熒光通道、四個405nm（紫色）熒光通道和兩個808nm（紅外）熒光通道。 儀器本身包含13個帶通濾光片，可以根據(jù)需要進行配置。用戶可啟用目前研究所需通道，隨著研究的深入，后續(xù)可增加通道數(shù)量。 包括13個可復位的帶通濾光片 450/45 585/42 660/10（2） 712/25 840/20 525/40（2） 610/20 690/50 763/43（2） 885/40   可選配置 激光數(shù) 熒光通道 488NM（藍光） 638NM（紅光） 405NM（紫光） 808NM（紅外光） 4 13 4 3 4 2 3 10 4   4 2 3 9 4 3   2 2 6 4     2 CytoFLEX S性能參數(shù) 最小上樣體積 10μL 檢測速度（15個參數(shù)） 30,000 events/s 預設流速 10、30 或60 μL/min 進樣方式 可配板式自動進樣器 孔板兼容性 單管；平底、U 型和 V 型底標準 96 孔板 校準方式 光路自動校準 軟件 CytExpert采樣與分析軟件 動態(tài)數(shù)據(jù)顯示范圍 7個數(shù)量級 熒光靈敏度 FITC< 30 MESF，PE<10 MESF 信號收集系統(tǒng) Clear Focus，可實現(xiàn)10-7到107的信號顯示 最小微粒檢測值 200nm 激光器 50mW，全固態(tài)，高功率；非共線激發(fā)；具溫控系統(tǒng)，即開即用 升級空間 最高可至四激光13色 重量 ＜22 kg 體積 40.6 cm x 40.5 cm x 33 cm，可安裝在實驗臺面或標準生物安全柜內(nèi)   ·CytoFLEX LX流式細胞儀 CytoFLEX LX型號配置六色激光，提供多達21個熒光通道，可以簡化復雜實驗，滿足用戶在相關研究領域的需求。 藍-紅-紫-黃綠-近紫外-紅外光（B-R-V-Y-N-I）系列 CytoFLEX LX 該款流式細胞儀可同時檢測23個參數(shù)，包括21個熒光參數(shù)。最高配置時，其不同波長激光的熒光通道數(shù)如下：488nm（藍色）：3個；638nm（紅色）：3個；405nm（紫色）：5個；561nm（黃綠色）：5個；375nm（近紫外）：3個；以及808nm（紅外光）：2個。 儀器包括21個帶通濾光片，可根據(jù)需要進行配置。用戶可啟用目前研究所需通道，隨著研究的深入，后續(xù)可增加通道數(shù)量。 包括21個可復位的帶通濾光片 450/45（2） 525/40（2） 525/45 585/42 610/20（3） 660/10（2） 675/30（2） 690/50 710/50 712/25 763/43（3） 840/20 885/40   可選配置 激光數(shù) 熒光通道 488NM（藍光） 638NM（紅光） 405NM（紫光） 561NM（黃綠光） 375NM （近紫外光） 808NM（紅外光） 6 21 3 3 5 5 3 2 5 19 3 3 5 5 3     CytoFLEX LX性能參數(shù) 側(cè)向散射光分辨率 藍光（488nm）＜300nm；紫光（405nm）＜200nm 熒光靈敏度 FITC< 30 MESF，PE<10 MESF 檢測速度（15個參數(shù)） 30,000 events/s 信號處理 全數(shù)字化系統(tǒng)，7個十進制數(shù)據(jù)顯示 鞘液和樣品傳輸 超低壓蠕動泵 樣品流速 固定流速：10、30及60μL/min 自定義流速控制：10-240μL/min，按1μL增量調(diào)節(jié) 板孔進樣模式 96孔標準平底，U和V底板 動態(tài)數(shù)據(jù)顯示范圍 7個數(shù)量級 軟件 CytExpert采樣與分析軟件 標準化校準 自動校準增益參數(shù)值 補償 自動/手動全矩陣補償 體積 60.5 cm x 73.3 cm x 45.1 cm 重量 79kg

參考文獻

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