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單細胞采集和組織顯微切割儀

技術(shù)原理 

 

細胞和組織獲取系統(tǒng)(CTAS)——基于毛細管的真空脈沖輔助技術(shù)

UnipicK+單細胞采集和組織顯微切割儀,在已獲專利保護的“細胞和組織獲取系統(tǒng)(CTAS)”基礎(chǔ)上,采用基于毛細管的真空脈沖輔助技術(shù)——以真空脈沖負壓為動力,玻璃毛細管為工具,在顯微鏡直接觀察下,根據(jù)細胞形態(tài)、熒光標記、解剖學(xué)特征或特定位置,從貼壁、懸浮和3D立體培養(yǎng)的細胞中快速精確地采集單細胞或細胞克隆,或者從組織切片中顯微切割特異性組織區(qū)域。
UnipicK+的主要組成部件包括:頂部帶有可調(diào)節(jié)LED環(huán)形燈的操作頭,真空管路和電纜,帶有真空模塊的控制箱(配備數(shù)字化的操作界面),以及可將設(shè)備安裝于大多數(shù)倒置顯微鏡上的通用型支架。使用時,在取樣器頭部安裝即用型一次性毛細管單元(DCU),通過操控DCU做垂直運動,為校準和采樣提供精確定位;取樣器頭部的LED環(huán)形燈可用于照亮組織樣本;真空模塊包含電子控制裝置和帶氣動管道的真空泵;真空強度、持續(xù)時間以及LED燈強度均可按實際操作需要進行調(diào)節(jié)。

 



產(chǎn)品應(yīng)用/特點 

 

UnipicK+應(yīng)用

·單細胞采集
UnipicK+可從細胞培養(yǎng)皿/板或組織切片中采集單個細胞,目前已在幾乎所有類型的貼壁、懸浮以及3D培養(yǎng)的細胞中證明了此種采集方法的可行性,包括一些處理起來十分困難的樣品,如原代細胞,或取自新鮮冷凍和蔗糖處理的復(fù)合組織(如腦)的單個細胞。
·組織顯微切割
UnipicK+適用于從復(fù)雜異質(zhì)性組織(如腦)中采集得到特定區(qū)域的組織,即對目標組織區(qū)域進行顯微切割操作。
·單細胞克隆與測序分析
UnipicK+配備有自動分配系統(tǒng),與下游單細胞分析及下一代測序操作兼容,可在采集完成后將樣本分配到培養(yǎng)板、PCR管、8排管、48孔板中,方便進行后續(xù)的單細胞克隆擴增、提取核酸進行PCR、微陣列和測序分析等

 

UnipicK+應(yīng)用舉例

 

UnipicK+適用的研究領(lǐng)域:
神經(jīng)科學(xué),干細胞生物學(xué)和單細胞分析,癌癥生物學(xué)等領(lǐng)域。

UnipicK+產(chǎn)品特點:
1. 數(shù)字化的操作界面,簡單易懂,無須復(fù)雜的培訓(xùn)即可上手。
2. 在顯微鏡下對組織切片的目標區(qū)域進行有效切割,或從標準細胞培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿中生長的任何貼壁培養(yǎng)物中收集和沉積單個細胞,體積小至15 nl。
3. 與各種下游單細胞分析和下一代測序操作兼容,方便提取用于下游組學(xué)研究的高質(zhì)量RNA和蛋白質(zhì)。
4. 采集過程不涉及輻射、激光、熱和化學(xué)處理,對細胞活性的影響較小,因此收集后的細胞具有較高的存活能力,可以用于再培養(yǎng);對細胞內(nèi)大分子活性和完整性影響也較小,適合下游單細胞測序等分析。
5. 適合于多種倒置顯微鏡。
6. 性價比高,因真空負壓輔助技術(shù)成本低,僅占激光輔助的顯微切割儀成本的一小部分。


耗材 

一次性毛細管單元(DCU):

·由粗(K)壁或薄(N)壁硼硅酸鹽毛細管制成;無菌。
·直徑范圍10-100μm,使用范圍從單細胞采集、培養(yǎng)細胞克隆采集、到特定組織區(qū)域的顯微切割。
·DCU的內(nèi)徑大致對應(yīng)于采集區(qū)域的大小,采集區(qū)域可能會由于所設(shè)定的真空持續(xù)時間和強度而有所不同。
·每包裝6個。

 


 

附件:

通用型支架:
將UnipicK+與幾乎任何類型的倒置顯微鏡連接,從單細胞培養(yǎng)到更先進的系統(tǒng),使實驗工作更具靈活性。

 


通用型載物臺適配器:
實現(xiàn)從多種培養(yǎng)裝置中采集和分配樣本:切片到切片,板到板,切片到板,切片/板到PCR管/8管條/48孔板。



產(chǎn)品規(guī)格 

界面

數(shù)字化操作

壓力泵最大正壓

5 PSI(≈258.6mmHg / 34.5 kPa)

真空泵最大負壓

10 PSI(≈517.1mmHg / 69.0 kPa)

壓力持續(xù)時間

0.1 ~ 1.0 s

樣本兼容性

貼壁細胞,懸浮細胞,3D培養(yǎng)物,新鮮活組織,新鮮冷凍組織,蔗糖處理組織和固定過的組織等

樣本分辨率

培養(yǎng)的單細胞和內(nèi)徑20μm的組織切片

適用組織切片厚度范圍

5-300μm

細胞存活率

可達95%(數(shù)據(jù)來自于對3T3、CHO以及SH-SY5Y細胞系的評估)

一次性毛細管單元(DCU)規(guī)格

10 ~ 100 μm

線性馬達單次位移距離

1.5 μm

線性馬達最大位移距離

23.3 mm

線性馬達最大位移速度

0.30 mm/s

樣本載體

25mm載玻片;
35mm和50mm培養(yǎng)皿;
96/24/12/6孔培養(yǎng)板;
48孔PCR管;
微流芯片等

分配通量

可達48個樣本

采集體積

DCU20μm:10nl- 2.5μl
DCU30μm:35nl- 3.0μl
DCU40μm:70nl- 5.0μl
(由標準DMEM培養(yǎng)基計算得出;實際采集量取決于DCU直徑和樣本粘度)

采集速度

組織切片 - 可達12個細胞/min
細胞培養(yǎng)物 - 可達25個細胞/min
(預(yù)估的采集速度僅作為參考值,實際速度可能與用戶/應(yīng)用相關(guān))

顯微鏡兼容性

可兼容多種型號的倒置顯微鏡



參考文獻 

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